FBXL20通過激活Wnt-β-catenin通路促進人類食管癌細胞的增殖、遷移和侵襲.pdf

1、目的：
　　研究FBXL20在食管癌中的表達，初步探究在食管癌中的作用及其相關機制。為食管癌的早期診斷，早期治療以及預后的評價提供新的生物學標記物。
　　方法：
　　通過qRT-PCR以及免疫組化技術(shù)來檢測FBXL20基因在食管癌及癌旁組織中mRNA和蛋白層面表達的差異。通過qRT-PCR篩選FBXL20表達量較高的兩株食管癌細胞株，并進行慢病毒轉(zhuǎn)染。通過qRT-PCR和Western blot技術(shù)來分析轉(zhuǎn)染前后細胞株

2、中FBXL20 mRNA和蛋白表達水平差異。通過流式細胞術(shù)檢測沉默表達FBXL20對細胞周期和凋亡的影響。通過單克隆形成和CCK-8實驗檢測沉默表達FBXL20對細胞增殖能力的影響。通過Transwell實驗檢測沉默表達FBXL20對細胞遷移和侵襲能力的影響。通過Western blot實驗分析FBXL20及Wnt/β-catenin信號通路相關的因子表達情況。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析選用GraphPad Prism5和SPSS17.0軟件。

3、>　　結(jié)果：
　　本實驗證實FBXL20在食管癌組織中較癌旁組織中是高表達，表達存在差異性。由此推測FBXL20可能在食管癌中是致癌基因，且對于食管癌的過程起到促進作用。在體外實驗，成功構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的沉默表達FBXL20的EC109和KYSE150食管癌細胞株，沉默表達FBXL20可以使細胞周期阻滯，增加細胞凋亡率，從而抑制細胞增殖，同時沉默表達FBXL20細胞的遷移、侵襲能力降低。我們證實FBXL20通過Wnt/β-cateni