表面分子CD25的下調延長同種異體角膜植片存活的實驗研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩49頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的:
  1.通過建立同種異體大鼠的角膜移植實驗模型,探討CD25-siRNA基因治療能否抑制角膜移植免疫排斥反應,及其機制是否與調節(jié)Treg/Th1細胞因子的表達有關。
  2.通過建立同種異體小鼠的高危角膜移植實驗模型,探討CD25單抗、雷帕霉素的效應是否與DC細胞、Treg細胞的調節(jié)有關。
  方法:
  1.Wistar大鼠作為供體,SD大鼠作為受體,構建大鼠的角膜移植模型。將術后大鼠隨機分為3組,分別

2、為移植對照組、無義siRNA轉染組和CD25-siRNA轉染組。術后1周后開始,每天對植片行臨床評分。于術后14天行HE染色檢測角膜組織病理情況,行免疫組化檢測IL-10、TGF-β、IFN-γ、IL-1β、TNF-α和Foxp3因子的表達。分別于術后3、7、14、21天行流式檢測術后大鼠外周血中CD4+T細胞的比例。
  2.C57BL/6小鼠作為供體,Balb/c小鼠作為受體,受體右眼角膜縫線后2周行穿透性角膜移植手術,構建小

3、鼠的高危角膜移植模型。將術后小鼠隨機分為4組,分別為移植對照組、CD25單抗組、雷帕霉素組和CD25單抗聯(lián)合雷帕霉素組。于術后12天行HE和DC細胞的免疫組化。術后第12天應用流式細胞儀分析各組小鼠引流淋巴結、脾臟中CD4+T,Treg細胞,DC細胞的比例;應用qRT-PCR分析各組植片和引流淋巴結中細胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-1β和TGF-β)的mRNA表達水平。術后4周內每日觀察角膜植片的存活情況。
  結果:

4、>  1.在Wistar-SD大鼠低危角膜移植模型中,與移植對照組、無義CD25siRNA轉染組相比,CD25siRNA轉染組植片渾濁、水腫及新生血管化指標的評分減低,角膜植片的存活時長顯著增加(p<0.05)。術后第14天免疫組化顯示,CD25-siRNA轉染組的IL-10、TGF-β的表達高于另外兩組; IFN-γ、TNF-α和IL-1β的表達低于另外兩組;而Foxp3的表達三組之間無顯著差異。術后3、7、14、21天,對照組外周血

5、CD4+T淋巴細胞亞群比例逐漸增加,而CD25-siRNA轉染組的每個時間點,CD4+ T細胞的比例都低于對照組(p<0.05)。
  2.在C57BL/6—Balb/c小鼠高危穿透性角膜移植模型中,與對照組相比,干預組植片的存活時長顯著增加(p<0.05)。術后第12天,CD25單抗組、雷帕霉素組和CD25單抗聯(lián)合雷帕霉素組3組植片的炎癥減輕,DC細胞在植片的分布減少,引流淋巴結中DC細胞和CD4+T細胞所占比例減少。雷帕霉素組

6、淋巴結的Treg細胞比例高于對照組,CD25單抗組低于對照組,而聯(lián)合干預組Treg細胞保持在對照組的一致水平。術后12天于對照組相比,3組干預組植片的IFN-γ、IL-2、IL-1βmRNA明顯降低,此外,CD25單抗組、CD25單抗聯(lián)合雷帕霉素組的TGF-βmRNA顯著升高。
  結論:
  1.下調表面分子CD25的表達能有效抑制角膜移植排斥反應的發(fā)生,延長角膜植片的存活時間。
  2.CD25的下調減輕排斥反應的

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論