嘉興地區(qū)產NDM-1腸桿菌科細菌流行及傳播機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌(CRE)是臨床面臨的重大問題,浙江省CRE的檢出高,主要以產KPC和NDM酶為主。本研究針對浙江嘉興地區(qū)分離的58株CRE菌株進行碳青霉烯酶耐藥基因檢測和同源性分析,了解嘉興地區(qū)碳青霉烯耐藥的分子流行病學及耐藥機制;通過NDM-1耐藥基因周圍序列分析,闡明產NDM-1腸桿菌科細菌傳播機制。
  方法:紙片擴散法篩選耐藥菌株;瓊脂稀釋法測定抗生素最低抑菌濃度(MIC);PCR擴增超光譜β-內酰胺酶(

2、blaTEM、blaSHV和blaCTX-M)和碳青霉烯酶(blaKPC-2、blaNDM-1、blaIMP-1、blaIMP-2、blaVIM-1、blaVIM-2和blaOXA-48)基因,研究細菌對頭孢菌素類抗生素和碳青霉烯類抗生素耐藥的分子機制;脈沖場凝膠電泳(PFGE)研究菌株同源性;多位點序列分型(MLST)對大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌進行ST分型;接合試驗研究質粒轉移能力;依據PCR的復制子分型對質粒進行分型;雜

3、交試驗確定攜帶blaNDM-1質粒大小;PCR擴增blaNDM-1基因周圍序列。
  結果:58株腸桿菌科細菌對亞胺培南和美羅培南耐藥;對其進行碳青霉烯類抗生素耐藥基因檢測發(fā)現,29株含有碳青霉烯酶NDM-1,且菌株對碳青霉烯類抗生素和頭孢類抗生素均耐藥;產NDM-1菌株中,86.9%(26/29)合并ESBLs耐藥基因出現;產NDM-1菌株中,7株同時含有NDM-1和KPC-2;一株同時含有NDM-1和IMP-4;一株同時含有N

4、DM-1和VIM-1。對產NDM-1菌株進行PFGE分析發(fā)現,存在同一克隆菌株在醫(yī)院內分布流行現象;多位點序列分型首次對產NDM-1陰溝腸桿菌進行分析,五株陰溝腸桿菌為ST114;除兩株(ECL-8,CF-17)菌株外,其他27株產NDM-1菌株均將攜帶NDM-1質粒接合進入大腸埃希菌J53;雜交試驗發(fā)現攜帶blaNDM-1質粒位于50-300kb大小質粒上并且多數質粒分型為IncX3型質粒;對菌株進行NDM-1周圍環(huán)境分析發(fā)現,有5株

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