一氧化氮(NO)、殼寡糖和花青素對桃果實采后褐腐病控制機理初步研究.pdf

1、本文以肥城桃為試材，在一氧化氮(NO)、殼寡糖和花青素等生物學作用的基礎上，結合果蔬采后病害防治方法、分子生物學方法和現(xiàn)代化學儀器分析等手段，從NO和病原菌菌絲及孢子的互作入手，研究外源NO對桃褐腐病病原菌的生長和致病力的影響作用，研究外源NO等處理對采后桃果實褐腐病的防治作用，系統(tǒng)探討外源NO處理對桃果實防御酶（幾丁質酶、β-1，3-葡聚糖酶）活性及抗病相關基因（幾丁質酶基因、β-1，3-葡聚糖酶基因、病程相關蛋白1基因、病程相關蛋白

2、10基因）表達的影響，進而探索影響NO抗病途徑的關鍵因子，為NO在果實防腐保鮮上的實際應用奠定基礎，深入探討外源NO等對采后桃果實褐腐病的防治效果及防治機理。此外實驗還擴展了殼寡糖和花青素在果實采后病害的防治應用中的潛在價值和并初步探討其作用機理。
　　 肥城桃是我國的名優(yōu)果品，屬中晚熟品種，8月底至9月上旬采收，由于采收期溫度較高，果實極易腐爛。褐腐病(Monilinia fructieola(G.Wint) Honey)是肥

3、城桃果實上最常見也是危害嚴重的病害之一，果實一旦感病，會迅速發(fā)生大面積腐爛，致使桃的貯藏、運輸、銷售等受到局限。
　　 本研究首先利用不同濃度NO溶液（0、5、15、30和100μmol L-1）處理褐腐菌孢子觀察NO對褐腐菌菌絲生長孢子萌發(fā)和致病力的影響，結果顯示5、15和30μmol L-1 NO處理未對褐腐菌產(chǎn)生顯著性影響，100μmol L-1 NO處理明顯抑制了孢子的萌發(fā)、菌絲的生長和致病力。
　　 分別利用去

4、離子水、15μmol L-1 NO、5μmol L-1 cPTIO、1.5％的殼寡糖和1.5％的紫甘薯花青素分別處理接種褐腐菌（5×105個孢子/mL）后的肥城桃果實，分別于1、2、3、4、5d測定病斑面積和發(fā)病率，果實于接種后的0、12、24、48、72 h取樣后測定幾丁質酶(CHI)和β-1，3-葡聚糖酶(GNS)活性變化，利用熒光定量PCR方法測定病程相關蛋白1基因(PR-1)、病程相關蛋白10基因(PR-10)、幾丁質酶基因(C

5、HI)及β-1，3-葡聚糖酶基因(GNS)的相對表達量。外源NO、殼寡糖和花青素處理均可以有效抑制肥城桃果實褐腐病病斑的擴展，延緩果實發(fā)病，cPTIO處理促進果實發(fā)病和病斑面積擴展;外源NO和殼寡糖均能有效提高果實PR-1、PR-10、CHI及GNS的相對表達量及CHI和GNS的活力，花青素能明顯提高果實CHI基因的相對表達量及CHI活力，在處理后的初期可以提高PR-1及PR-10的相對表達量，但是不能提高GNS的相對表達量和GNS的活

6、力，cPTIO處理抑制果實PR-1、PR-10、CHI及GNS的相對表達量及CHI和GNS的活力。外源NO、殼寡糖和花青素均可以通過提高肥城桃果實病程相關蛋白基因的表達量和酶活性從而提高其抗病性。
　　 此外本研究通過提取效率優(yōu)化紫甘薯中花青素的提取條件，分別對提取溶液、提取濃度、提取溫度、提取時間、提取固液比進行優(yōu)化，紫甘薯花青素最適宜提取條件為15％乙酸溶液、40℃、60 min、1∶25（g/mL）固液比，此方法提取紫甘薯