利用嵌合體組織重組技術進行人類牙齒再生的研究.pdf

1、目前人類牙齒的缺陷或缺失是普遍的現(xiàn)象，利用嵌合體組織重組技術進行人類牙齒再生的研究，其最終目的是探討人牙髓干細胞的成牙潛能，并初步建立體外再生人類牙齒結構的技術模型，為利用人類自身的干細胞在體外再生出可移植的牙胚或牙齒的進一步研究奠定理論和技術基礎。 本研究利用體外細胞培養(yǎng)的方法分離、培養(yǎng)兒童的乳牙牙髓干細胞(SHED)和成人的第三磨牙牙髓干細胞(DPSCs)，并通過組織重組、器官培養(yǎng)及組織形態(tài)學分析等方法，研究人牙髓干細胞的成

2、牙潛能。主要內容及結論如下：1、將SHED或DPSCs與鼠E10.5非牙源性上皮重組制備嵌合體，發(fā)現(xiàn)人牙髓干細胞不能誘導非牙源性上皮形成牙齒結構，說明SHED或DPSCs不具有誘導牙齒發(fā)育的能力；2、將SHED或DPSCs與鼠E10.5有誘導成牙能力的牙上皮重組制備嵌合體，并對不同發(fā)育時期-的重組組織塊進行形態(tài)學分析，沒有觀察到早期牙胚或牙齒結構的形成，表明SHED或DPSCs不能直接被有誘導成牙能力的牙上皮誘導成牙；3、用有誘導成牙能

3、力的鼠源磨牙牙胚間充質細胞與SHED或DPSCs混合后制備嵌合體，發(fā)現(xiàn)在E13.5鼠源磨牙牙胚間充質細胞存在的條件下，SHED或：DPSCs能被鼠源牙上皮誘導形成牙齒結構，說明SHED或DPSCs在體外可間接被誘導成牙；4、制備SHED或DPSCs與鼠E10.5牙源性上皮重組的嵌合體，在體外聯(lián)合外源生長因子(BMP-4或FGF-8)的誘導，發(fā)現(xiàn)在BMP-4或FGF-8的作用下，鼠牙源性上皮能夠誘導人牙髓干細胞形成牙齒結構，表明在外源生長