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文檔簡介
1、目的:
初步研究轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)在體外對小鼠顱蓋骨成骨細胞增殖及骨形態(tài)蛋白-2(BMP-2)及核心結(jié)合因子Al(Cbfal)mRNA表達的影響,探討轉(zhuǎn)化生長因子作用于成骨細胞的可能機制,為臨床供一定的理論依據(jù)。
方法:
1.培養(yǎng)小鼠成骨細胞,并觀察其形態(tài)和功能。
2.不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子β(0、0.01、100ng/ml)作用于原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細胞, 采用MTT(噻唑
2、藍)比色法測定培養(yǎng)液OD值。
3.不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子β(0、0.01、100ng/ml)干預原代培養(yǎng)的乳鼠成骨細胞,通過RT一PCR方法檢測BMP-2和Cbfal的表達水平。
4.統(tǒng)計學方法實驗所得的數(shù)據(jù)以x±s表示,采用spssl3.0統(tǒng)計學軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析,組間比較用LSD—t檢驗;方差不齊,組間比較用Dunnett T3法檢驗,P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:
3、1.體外培養(yǎng)的小鼠成骨細胞大多呈長梭形,堿性磷酸酶組織化學染色陽性,培養(yǎng)液中加入β一甘油磷酸鈉及L一抗壞血酸后鈣茜素紅染色陽性。
2.不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子β(0、0.01、100ng/ml)作用于原代培養(yǎng)的成骨細胞24小時后可促進其增值,OD值顯著增加P<0.05,TGF-β可明顯促進成骨細胞增殖。
3.通過半定量RT-PCR 檢測原代培養(yǎng)的成骨細胞BMP-2和CbfalmRNA的表達。結(jié)果顯示,隨著轉(zhuǎn)化生長
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