AhR活化對CD8αα+TCRα β+IELs的調節(jié)在結腸炎炎癥緩解中的作用及機制研究.pdf

1、背景與目的：
　　炎癥性腸病是一類由多種原因引起的，慢性復發(fā)性炎癥性疾病，主要累及結腸。研究表明，腸道免疫系統(tǒng)在炎癥性腸病的發(fā)病機制中發(fā)揮著重要的作用。另外，越來越多的證據表明：腸道黏膜免疫在腸道炎癥的發(fā)生發(fā)展中有著重要的作用。近期研究發(fā)現，固有免疫系統(tǒng)的缺陷能促進腸道的損傷性免疫反應發(fā)生，如果該缺陷能夠糾正也許能夠提高炎癥性腸病的治療效果。
　　腸上皮間淋巴細胞(Intestinal intraepithelial lym

2、phocytes，IELs)定植于腸上皮，根據其表型及起源可以將其分為傳統(tǒng)型與非傳統(tǒng)型。非傳統(tǒng)型主要包括CD8αα+TCRαβ+和TCRγδ+IELs。TCRγδ+IELs在黏膜穩(wěn)態(tài)中主要發(fā)揮保護性的作用。CD8αα+TCRαβ+IELs的功能和TCRγδ+IELs相似。CD8αα+TCRαβ+IELs對腸道免疫功能具有調節(jié)作用，研究表明CD8αα+TCRαβ+IELs能夠緩解腸道炎癥在黏膜穩(wěn)態(tài)中主要發(fā)揮保護性作用。
　　芳香烴受

3、體是一類配體依賴的核轉錄因子，控制著多種免疫細胞的發(fā)育及功能包括IELs和巨噬細胞。6甲?；胚岵3，2-b]咔唑是芳香烴受體內源性的配體。研究表明，6甲酰基吲哚并[3，2-b]咔唑能夠通過激活芳香烴受體抑制慢性炎癥，下調Th1相關的的細胞因子。有趣的是，在克羅恩病患者的腸道中芳香烴受體表達是下調的，而芳香烴受體對CD8αα+TCRαβ+和TCRγδ+IELs的發(fā)育有著重要的作用。以上結論提示6甲?；胚岵3，2-b]咔唑可能通過激

4、活AhR調控非傳統(tǒng)型IELs并影響急性結腸炎。
　　方法：
　　1.結腸炎模型的構建，含有3％DSS的飲用水喂養(yǎng)小鼠7d。記錄小鼠體重及狀態(tài)，取結腸組織進一步測量長度并提取IELs檢測。
　　2.流式細胞術檢測結腸非傳統(tǒng)型IELs比例及數量的變化，熒光定量PCR及流式細胞術檢測細胞因子的表達。
　　3.小鼠喂養(yǎng)3％DSS于笫2天開始進行腹腔注射FICZ。體質量、疾病活動指數及HE染色確定結腸結腸炎癥的變化。流式細

5、胞術檢測非傳統(tǒng)型IELs的變化，熒光定量PCR和流式細胞術檢測細胞因子的變化。
　　結果：
　　1.與對照組相比，DSS組小鼠體重從第四天開始下降，并且其結腸長度短于對照組。
　　DSS組疾病活動指數從第三天開始增加，組化結果表明DSS組結腸黏膜結構紊亂、斷裂，但在腹腔注射FICZ后上述損傷明顯緩解。
　　2.DSS組結腸CD8αα+TCRαβ+IELs的比例明顯低于對照組，在數量上得到的結果也是具有意義的。FI

6、CZ能夠明顯逆轉該變化，與DSS組相比，FICZ能夠明顯促進IELs中CYP1A1的表達。
　　3.與對照組相比，DSS組CD8αα+TCRαβ+IELs的凋亡率明顯高于對照組，而FICZ能夠下調DSS組CD8αα+TCRαβ+IELs的凋亡率。DSS組CD8αα+TCRαβ+IELs中AhR、IL15Rα、CD122、CD132的表達明顯低于對照組，而注射FICZ后CD8αα+TCRαβ+IELs內AhR、IL15Rα、CD12

7、2、CD132的表達明顯升高。
　　4.與對照組相比，DSS組中IELs表達的IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6明顯升高，而TGF-β1無變化，IL-10下調，表達IFN-γ的CD8αα+TCRαβ+IELs比例也明顯升高，表達IL-10的CD8αα+TCRαβ+IELs比例明顯下調，在注射FICZ后上述結果得到逆轉。
　　結論：
　　1.FICZ顯著緩解DSS誘導的小鼠急性結腸炎。
　　2.AhR活化