胃癌肝轉移早期預測因子的臨床及實驗研究.pdf

1、在我國，胃癌發(fā)病率和死亡率均很高，胃癌轉移到肝臟時有發(fā)生，是造成胃癌死亡的相關因素。據(jù)文獻報道，胃癌患者發(fā)現(xiàn)肝轉移的比例大約在5％-9％。由于對胃癌開展早期的篩查國家很少，而胃癌本身癥狀比較隱匿，導致大部分患者就診時多為晚期，并且這些病人常常伴有其他部位遠處轉移，因而導致根治性手術切除率低、術后轉移復發(fā)率高、患者的生存率很不樂觀。和結腸癌肝轉移行肝切除術的積極態(tài)度進行對比，胃癌肝轉移手術治療仍存在較大爭議，切除率較低，造成這種原因通常是

2、因為肝轉移只是胃癌遠處轉移中的一部分，同時還包括肝外轉移如淋巴結的廣泛種植、腹膜種植，以及周圍臟器、大血管的浸潤。因此，研究與胃癌肝轉移密切相關的臨床病理因素，及早發(fā)現(xiàn)并采取積極對策，無疑是提高胃癌肝轉移的診治水平和生存率的關鍵所在。
　　 胃癌肝轉移是一個多步驟、多因素參與的極其復雜的過程，經(jīng)過癌細胞從原發(fā)癌灶脫離、細胞外基質的破壞、脈管浸潤、轉移臟器新生血管形成再增殖等過程。在此過程中各自的粘附分子、血管新生因子、細胞外金屬

3、基質蛋白酶等多種癌基因出現(xiàn)異常。目前研究認為癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、肝細胞生長因子受體(C-met)、基質金屬蛋白酶(MMP)、環(huán)氧化酶2(COX-2)、血管內皮生長因子(VEGF)、微血管密度(MVD)及E-鈣粘素(E-cad)等在胃癌的侵襲、轉移中起著重要的作用。如何從眾多的影響因素中篩選出與胃癌肝轉移聯(lián)系最為緊密的因素作為預測胃癌肝轉移的有效指標有著重要的臨床意義，也是我們臨床醫(yī)生迫切希望解決的問題。
　　

4、 本研究擬通過對胃癌患者臨床資料的分析及與胃癌肝轉移相關生物分子的檢測，以期能闡明各種因素與胃癌肝轉移之間的聯(lián)系，找到較為準確的預測胃癌肝轉移的方法。因此，我們的實驗研究設計如下:
　　 (1)通過回顧性的病例研究，探討胃癌術后肝轉移與相關的臨床病理因素之間的聯(lián)系。
　　 (2)檢測CEA、AFP、C-met、MMP、COX-2、VEGF、MVD和E-cad等8種分子生物學指標在胃癌中的表達，并用統(tǒng)計學的方法篩選出與胃癌

5、肝轉移聯(lián)系最為密切的因子。
　　 (3)聯(lián)合檢測以上實驗篩選出的相關因子在胃癌中的表達，并進行一系列的診斷試驗，對各種診斷試驗進行評價，尋找較為理想的胃癌肝轉移的診斷模型。
　　 第一章胃癌肝轉移臨床病理特點分析
　　 目的:胃癌肝轉移作為最常見的轉移途徑之一，尚缺乏有效的預測、評估指標，
　　 本文即探討胃癌肝轉移與其臨床病理因素之間的關系，以便于評估胃癌肝轉移危險因素，尋找潛在的危險因子。
　　

6、 方法:回顧性分析2002年5月至2012年5月間收治的47例胃癌肝轉移患者的病例資料隨訪，并與同期收治的無轉移的745例胃癌病例資料進行比較，分析影響肝轉移的臨床病理因素。
　　 結果:①792例胃癌患者發(fā)生肝轉移47例，占5.9％(47/792)。②單因素分析結果顯示Borrmann分型(x2=11.2，P=0.019)、浸潤深度(x2=4，P=0.042)、淋巴結轉移(x2=13.9，P=0.000)、腹膜侵犯(x2=7

7、.7，P=0.028)和脈管癌栓（x2=20.4，P=0.000）等5項指標與胃癌肝轉移有關。③多因素logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，脈管浸潤(OR=8.975，P=0.000)、漿膜浸潤（OR=3.657，P=0.022）、淋巴結轉移(OR=6.752，P=0.000)等3項指標與胃癌肝轉移有關，是影響胃癌肝轉移最重要的因素。④單因素分析結果顯示，性別、年齡、腫瘤部位、大體形態(tài)和腫瘤長徑與胃癌肝轉移無關。
　　 結論:①腹膜侵犯

8、、脈管浸潤、淋巴結轉移、以及腫瘤Bormann分型、浸潤深度等5項指標都與胃癌肝轉移有關。②脈管浸潤、浸潤深度和淋巴結轉移等3項指標是影響胃癌肝轉移的重要因素。
　　 第二章胃癌肝轉移潛在危險因子的多因素分析
　　 目的:聯(lián)合檢測胃癌的多個免疫組化指標，探討各指標與胃癌肝轉移的關系。
　　 方法:用免疫組織化學（SP法）檢測80例胃癌術后的腫瘤組織中CEA、AFP、C-met、MMP、COX-2、VEGF、MVD

9、和E-cad的表達，t檢驗分別分析各指標與胃癌肝轉移的關系，Logistic回歸進行多因素分析。
　　 結果:①CEA、AFP、VEGF、MVD和E-cad等5項免疫組化指標在肝轉移組和無肝轉移組的表達有顯著性差異(P＜0.05)，而C-met、MMP11和COX-2在兩組中表達無顯著性差異（P＞0.05）。②逐步Logistic回歸多因素分析（α入=0.10，α出=0.15）顯示，CEA、VEGF和E-cad等3項指標進入模型

10、方程，可解釋肝轉移發(fā)生原因的71.8％(r2=0.718)。
　　 結論:①8項免疫組化指標中，CEA、VEGF和E-cad與胃癌肝轉移相關。②CEA、COX-2和MVD可作為預測胃癌肝轉移的候選指標。
　　 第三章聯(lián)合檢測CEA、VEGF和E-cad mRNA表達在胃癌肝轉移中的意義
　　 目的:在接受根治性切除術的胃癌病人中13.0％-30.0％將最終出現(xiàn)肝轉移。為提高再手術切除率，早期預測和診斷胃癌術后肝轉

11、移就尤為必要。在第二章研究基礎上，進一步探討CEA、VEGF和E-cad的mRNA表達與胃癌術后肝轉移的關系，以評價它們在預測胃癌肝轉移中的作用以及臨床應用的可行性。
　　 方法:RT-PCR法檢測280例胃癌患者腫瘤標本中CEA、VEGF和E-cad的mRNA的表達水平，以CEA、VEGF和E-cad為指標預測胃癌術后肝轉移的發(fā)生，并以單指標法、平行試驗和系列試驗評價該診斷試驗。
　　 結果:①280例行根治術的胃癌患

12、者中，根據(jù)診斷金標準，術后4年內有39例發(fā)生肝轉移(13.9％)。②CEAmRNA表達呈陽性230例，VEGFmRNA表達呈陽性208例，E-cadmRNA表達呈陽性192例。③單獨以CEA為術后肝轉移預測指標，診斷實驗靈敏度為100％，特異度為20.7％;單獨以VEGF為預測指標，診斷實驗靈敏度為92.1％，特異度為28.6％;單獨以E-cad為預測指標，診斷實驗靈敏度為87.1％，特異度為37.4％。④以三指標聯(lián)合檢測平行實驗，診斷

13、靈敏度為100％，特異度為9.13％;若以三指標聯(lián)合檢測系列試驗，診斷靈敏度為89.7％，特異度為88.3％。
　　 結論:①分別以CEA、VEGF和E-cad單獨為胃癌術后肝轉移預測指標時，靈敏度和特異度不全滿意，分別為（100％和20.7％，92.1％和28.6％，87.1％和37.4％），因此不適合以單一指標預測胃癌術后肝轉移的發(fā)生。②三指標聯(lián)合檢測平行實驗時，靈敏度和特異度分別為100％和9.13％，特異度有較大降低，因