促紅細胞生成素預處理對嬰幼兒非紫紺型先天性心臟病心內直視手術心肌保護的作用研究.pdf

1、目的：
　　促紅細胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一種缺氧誘導分泌的具有促造血作用的激素，具有促進紅細胞生成、增加組織供氧的作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，對于缺血再灌注損傷的心肌組織，EPO具有良好的保護作用，能夠抑制心肌細胞凋亡、保存缺血心肌的ATP水平、抗炎及促進心肌血管增生。其部分分子機制與抑制糖原合成激酶3β，活化PI-3K/Akt，PKC，ERK1/2，線粒體ATP依賴的鉀通道有關。促紅細胞生成素已應用于臨床

2、多個領域，但其對于心肌保護作用的研究大多數(shù)停留在動物試驗階段，其對于人體的用藥劑量仍未明確。本研究的目的是通過EPO對先心病患兒心內直視手術后心肌組織熱休克蛋白70(HSP70)及細胞外信號調節(jié)蛋白激酶(ERK1/2)表達的影響及術后心肌酶譜、肌鈣蛋白、C反應蛋白等臨床數(shù)據(jù)探討其對于缺血再灌注心肌保護的治療劑量。
　　材料與方法：
　　選取中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院心臟外科2013年4月至2013年11月40名小于2歲的非紫紺

3、型先天性心臟病患兒，進行體外循環(huán)(CardiopulmonaryBypass，CPB)心內直視手術。其中男19例，女21例，平均年齡1.2歲，其中室間隔缺損27例，房間隔缺損7例，室間隔缺損合并房間隔缺損5例，室間隔缺損合并房間隔缺損及動脈導管未閉3例，室間隔缺損合并右室流出道狹窄1例，術前心功能Ⅱ級，無肺動脈高壓，無肝腎功能不全，無EPO使用史，圍手術期無感染。將患者隨機分為A，B，C三組。其中A組12人，B組12人，C組16人。

4、r>　　A組患者從手術前12h開始，皮下注射EPO150IU/kg，B組患者從手術前12h開始，皮下注射EPO300IU/kg，C組患者手術前12h皮下注射等體積生理鹽水。三組其余處理方式相同。入手術室后建立靜脈通路，監(jiān)測心電圖、呼吸、血氧飽和度，橈動脈穿刺置管監(jiān)測動態(tài)血壓;麻醉誘導用咪達唑侖0.1～0.05mg/kg，舒芬太尼1～2μg/kg，阿曲庫銨0.1～0.2mg/kg，行氣管插管，機械通氣;頸內靜脈置管監(jiān)測中心靜脈壓力(CVP

5、)，麻醉維持;CPB期間保持紅細胞壓積(Hct)在0.25～0.30之間，淺低溫，鼻溫保持在30℃～32℃，CPB灌注流量(2.8～3.2L·min-1·m-2)，灌注壓維持在90～100mmHg。采用4℃溫血停搏液15ml/kg自主動脈根部順行灌注使心臟停跳，隨后劑量減半，每30min灌注1次。所有患者均經(jīng)右心房切口，心內操作結束后開放升主動脈，復溫至37.5℃，循環(huán)穩(wěn)定后停CPB，縫合右房切口，依次拔除各個插管。此時應用心耳鉗鉗夾右

6、心耳，迅速剪下心耳組織后縫扎右心耳。取下心肌組織于液氮中保存。分別于入院后及手術后第24、48、72h這4個時間點檢測血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、高敏感度C反應蛋白（hs-CRP）水平。Real-timePCR方法檢測右心耳心肌組織HSP70mRNA和ERK1/2mRNA的表達水平，并用相關分析分析HSP70mRNA和ERK1/2mRNA的表達量的相關關系。實驗結果均用均數(shù)±標準差（(x)

7、±s）來表示，采用統(tǒng)計軟件SPSS13.0進行數(shù)據(jù)分析。
　　結果：
　　1、三組患者術前一般資料情況及手術體外循環(huán)時間和主動脈阻斷時間無統(tǒng)計學差異。三組患者均無死亡、無嚴重并發(fā)癥、無血栓栓塞發(fā)生。與對照組（2.7±0.17）相比，A組（11.2±0.66）、B組（6.3±0.43）HSP70均顯著升高(P＜0.01);A組與B組相比，A組HSP70顯著升高(P＜0.01)。與對照組（4.5±0.10）組比較，A組（19.0

8、±0.15）及B組（13.5±0.16）ERK1/2mRNA表達水平顯著升高(P＜0.01);A組與B組比較，A組ERK1/2mRNA升高顯著（P＜0.01）。
　　2、A組和B組在手術結束后各時間點CK、CK-MB、cTnⅠ、hs-CRP明顯低于C組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3、A組和B組患者血CK、CK-MB、cTnⅠ、hs-CRP水平在手術后明顯升高(P＜0.05)，A組升高水平在手術后第24、48、7