中藥荷丹片的化學物質基礎與質量控制研究.pdf

1、高脂血癥是現代富貴文明病之一。隨著生活的質量提高，高蛋白、高脂飲食機會增多，加上運動量減少，血中的脂肪由于沒法燃燒消耗而積聚從而導致高脂血癥。在中國，高脂血癥人群隨經濟的發(fā)展而增加，其年輕化的趨勢令人擔心。醫(yī)學界已經證明--高脂血癥者患心臟病的機會是正常人的四倍。據統計，現在我國至少有9000萬人患有高脂血癥。大量研究資料表明，高脂血癥是腦卒中、冠心病、心肌梗死、心臟猝死獨立而重要的危險因素。此外，高脂血癥也是促進高血壓、糖耐量異常、糖

2、尿病的一個重要危險因素。高脂血癥還可導致脂肪肝等其他嚴重疾病。
　　 中藥在治療高脂血癥方面相比較于西藥有著獨特的優(yōu)勢，其療效肯定，持續(xù)，副作用小。特別是在辨證分型方面，體現了中醫(yī)靈活組方，因人制宜的治療特色。中醫(yī)學上無高脂血癥病名，臨床辨證多歸于肝腎虧虛，脾虛痰濁，氣滯血瘀。治療時大多用補益肝腎，健脾益氣，滋陰養(yǎng)血，活血化瘀，清熱通便，消食化痰這些藥。
　　 荷丹片為國著名老中醫(yī)楊濟生獻方研制，具有明確降血脂療效的中藥

3、復方。本方由荷葉、丹參、山楂、番瀉葉、補骨脂（鹽炒）五味中藥組方制備而成，具有化痰降濁、活血化瘀的功效。適片于高脂血癥屬痰濁夾瘀者。本方荷葉為君藥，行氣祛濕；丹參為臣藥，活血化瘀；補骨脂為臣藥，溫補肝腎；山楂為佐藥，消食化積；番瀉葉為使藥，瀉熱行滯，通便利水。具有化痰降濁，活血化瘀，補益肝腎，健脾消食，以消除痰瘀，調整臟腑功能，起驅邪扶正之作用。臨床效果明顯。
　　 近年來，對于荷丹片的研究較少，少數報道集中在其降血脂效果及臨床

4、觀察方面，對于該復方所含成分及降血脂有效成分的研究鮮有報道，作為一種科學客觀的分析與質量控制技術，明確荷丹片中所含成分，研究這些成分在體內的代謝變化與降血脂作用的相關性，對于尋找該復方藥效成分并對其進行質量控制有著極其重要的意義。
　　 然而中藥藥效物質基礎的研究不僅要求對其中指標性成分進行精確的含量測定，還需對其中所含各類化學成分進行鑒別，從而達到整體全面地控制與評價中藥質量。中藥藥效成分的研究不儀要求對其本身所含化學成分進行

5、區(qū)分鑒別，還需對其入血成分進行分析測定，確定可能的約效成分，同時進一步對其體內代謝過程和作用機理進行研究，最終確定中藥的有效成分。
　　 中藥成分分析研究的復雜性與整體性，決定了單靠一種類型的分析技術并不能滿足中藥分析的要求，所以必須考慮采用多種聯用分析技術進行綜合分析，發(fā)揮各種聯用技術的優(yōu)勢。本論文基于現代聯用分析技術，以荷丹片為研究對象，從體內外成分分析入手，建立了一套用于中藥體內外成分鑒別與藥效成分初步篩選的方法與模式，并

6、將這些方法及相關技術應用于荷丹片全面質量控制中。針對荷丹片中成分分析的要求，建立了HPLC-TOF/MS用于中藥復雜成分快速分析鑒別的方法與研究模式。借助HPLC-TOF/MS對荷丹片中41個化學成分進行了初步定性。其中來自荷葉中的成分有17個，丹參中的成分有10個，補骨脂中的成分有8個，山楂中的成分有5個，希瀉葉中的成分有1個。與傳統中醫(yī)藥的君臣佐使理論相符。
　　 由于荷丹片為五味中藥組成的復方，方中化學成分眾多，且含有大量

7、同分異構體，為了對這些同分異構體也能進行很好的拆分。通過調整TOF/MS質譜儀的碎片電壓，將同分異構體成分在不同電壓下打碎，根據同分異構體在不同電壓下的不同碎片離子，對化學成分進行推測，實現了在TOF/MS質譜儀上，不但能夠利用精確分子量確定化合物的分子式，而且通過碎片離子將同一分子式的不同同分異構體進行了有一定根據的鑒別和分析。
　　 在對荷丹片中的成分研究中發(fā)現，荷葉中的主要成分為生物堿類，丹參中的主要成分為丹參醌類，而補骨

8、脂中的主要成分為香豆素類成分。根據某一類成分的裂解規(guī)律的總結和已有文獻的查閱，確定生物堿類成分的裂解方式主要以RDA裂解為主，而丹參醌類化合物的裂解方式主要以功能基的裂解為主。
　　 在對中藥材化學成分分析鑒別的基礎上，通過給SD大鼠灌胃給藥荷丹片，借助HPLC-TOF/MS，對比體外荷丹片藥材化學成分峰，對大鼠血漿中成分進行分析鑒別，共鑒別出大鼠血漿中11個以原型入血的成分。
　　 在系統考察了色譜條件和樣品前處理方法