芡實(shí)對(duì)糖尿病腎病大鼠腎臟組織MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　探索芡實(shí)對(duì)DN大鼠腎臟中MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ表達(dá)的影響。
　　方法：
　　將65只健康雄性Wistar大鼠，隨機(jī)取10只選為正常組（N組）；余55只大鼠利用一次性腹腔里注入鏈脲佐菌素（STZ35mg/kg）制造DN模型，模型制造成功后，隨機(jī)分成DN組、芡實(shí)低劑量組（EL1.5g·kg-1·d-1）、中劑量組（EM3.0g·kg-1·d-1）、高劑量組（EH6.0g·kg-1·d-1）

2、及氯沙坦鉀組（LP30mg·kg-1·d-1），各組11只，分別予以不同劑量的芡實(shí)以及氯沙坦鉀藥物，N組及DN組予以等體積的蒸餾水，使用灌胃途徑給藥。12周后，化驗(yàn)大鼠血糖、24小時(shí)尿蛋白定量、肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿白蛋白之排泄率（UAER）、尿蛋白/肌酐（Up/Ucr）；HE、Masson、PAS染色予以觀察各組大鼠的腎臟病理改變；免疫組織化學(xué)法測(cè)定各組大鼠腎組織MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ表達(dá)情況；運(yùn)用

3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time PCR）技術(shù)檢測(cè)腎組織中MMP-9、TIMP-1及CollagenⅣ基因mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.生化指標(biāo)結(jié)果：藥物處理12周末，與N組比較，DN組血糖、24h尿蛋白定量、Scr、BUN、UAER、Up/Ucr顯著升高（ p＜0.05）；與DN組比較，EL組24h尿蛋白定量、Scr、BUN、UAER、Up/Ucr無(wú)明顯減低（ p＞0.05）；EM組、EH組及LP組24h尿蛋

4、白定量、Scr、BUN、UAER、Up/Ucr明顯下降（ p＜0.05），但仍高于N組；EM組、EH組及LP組各組間相比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ p＞0.05）。與DN組相比，EL組、EM組、EH組及LP組血糖均未見顯著的變化。2.病理改變：與N組比較，DN組大鼠顯示腎小球的體積增大，系膜細(xì)胞增殖，細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）增加，基底膜增寬，部分腎小管出現(xiàn)萎縮及間質(zhì)中纖維組織增加；與DN組比較，EL組減輕不顯著；EM組、EH組及LP組上述的病理變化

5、明顯減輕。3.免疫組化結(jié)果顯示：（1）在各組大鼠腎組織MMP-9表達(dá)：N組大鼠腎小球的系膜區(qū)以及腎小管均可見棕黃色顆粒物質(zhì)，以腎小管為著。與N組比較，DN組大鼠中腎組織MMP-9表達(dá)顯著減少（ p＜0.05）；與DN組比較，EL組MMP-9表達(dá)增加不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ p＞0.05）；與DN組比較，EM組、EH組及LP組MMP-9表達(dá)顯著增加（ p＜0.05）；EM組、EH組及LP組各組之間的比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ p＞0.05）；（2

6、）在各組大鼠腎組織TIMP-1表達(dá)：N組大鼠在腎小管可見棕黃色顆粒，而腎小球的系膜區(qū)有散在棕黃色顆粒物質(zhì)；與N組相比，DN組大鼠中腎組織TIMP-1表達(dá)明顯增加（ p＜0.05）；與DN組比較，EL組TIMP-1表達(dá)減低不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ p＞0.05）；與DN組比較，EM組、EH組及LP組TIMP-1的表達(dá)顯著減少（ p＜0.05）；EM組、EH組及LP組各組之間的比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ p＞0.05）；（3）在各組大鼠腎組織Col

7、lagenⅣ表達(dá)：N組大鼠的腎小球基底膜（GBM）以及腎小管的基底膜均有棕黃色顆粒物質(zhì)；與N組比較，DN組腎臟中CollagenⅣ表達(dá)增加明顯（ p＜0.05）；與DN組比較，EL組CollagenⅣ表達(dá)減少不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ p＞0.05）；與DN組比較，EM組、EH組及LP組CollagenⅣ的表達(dá)顯著減少（ p＜0.05）；EM組、EH組及LP組各組之間的比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ p＞0.05）。4. Real-time PCR結(jié)

8、果：與N組比較，DN組MMP-9 mRNA表達(dá)顯著下降（ p＜0.05），TIMP-1及CollagenⅣmRNA表達(dá)顯著增加（ p＜0.05），MMP-9與TIMP-1 mRNA比值顯著下調(diào)（ p＜0.05）；與DN組比較，EL組MMP-9、TIMP-1以及CollagenⅣmRNA表達(dá)未見明顯變化，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（ p＞0.05）；與DN組比較，EM組、EH組及LP組MMP-9 mRNA表達(dá)顯著增加（ p＜0.05），TIMP-1及C