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1、目的:研究觀察微波消融聯(lián)合DC疫苗對(duì)荷H22肝癌小鼠的抑瘤效應(yīng),探討惡性腫瘤生物治療的新途徑。
方法:Km小鼠皮下接種H22細(xì)胞建立荷瘤動(dòng)物模型;應(yīng)用細(xì)胞因子GM-CSF、IL-4培養(yǎng)小鼠骨髓來源的DC,應(yīng)用反復(fù)凍融法提取制備H22細(xì)胞抗原,并致敏小鼠骨髓來源的DC; MTT法檢測(cè)DC誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)對(duì)H22細(xì)胞的細(xì)胞毒效應(yīng);荷瘤小鼠分為對(duì)照組(
2、PBS),DC疫苗組,微波消融組,微波消融聯(lián)合DC疫苗組;實(shí)驗(yàn)第7天微波消融,第7、11、15天瘤體周邊皮下注射DC疫苗共三次,每隔1天測(cè)量腫瘤體積大小,觀察腫瘤生長(zhǎng)情況;實(shí)驗(yàn)第20天摘眼球取血,ELISA法檢測(cè)小鼠血清INF-γ含量,并處死動(dòng)物取出瘤體稱重比較。
結(jié)果:
1、用凍融法制備的腫瘤抗原致敏骨髓來源DC制備DC疫苗,DC呈現(xiàn)典型的樹突狀細(xì)胞形態(tài)特征;
2、致敏DC能體外刺激淋巴細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)CT
3、L對(duì)H22的細(xì)胞毒效應(yīng),致敏DC組、未致敏DC組和單純淋巴細(xì)胞組的殺傷率分別為62.01±12.16%、40.06±5.28%和15.63±6.8%;
3、微波消融與DC疫苗聯(lián)合治療組的平均腫瘤體積均小于微波消融組、DC組和對(duì)照組(P<0.05),其抑瘤率為38%;微波消融與DC疫苗聯(lián)合組、微波消融組、DC組的血清INF-γ水平較對(duì)照組均有升高。
結(jié)論:經(jīng)腫瘤抗原致敏后可以獲得成熟的DC,該DC具有刺激淋巴細(xì)胞增殖并
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