Geranylgeranyltransferase I對神經元突觸發(fā)育的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究GeranylgeranyltransferaseI(GGT)與神經元突觸發(fā)育的關系；觀察過表達或下調GGTβ表達對大鼠腦海馬神經元突觸發(fā)育的影響，從而為神經元突觸發(fā)育機制提供新的理論依據。
　　 方法：1．提取不同發(fā)育時期（P0，P7，P14，P21，P28，成年）的大鼠海馬組織，用蛋白免疫印跡(WB)檢測GGT特異性β亞基的蛋白表達；2．取P14的大鼠海馬組織，進行總蛋白、突觸小體(Synaptosome)及突觸后

2、致密體(PSD)抽提，WB檢測GGTβ亞基是否定位于突觸部位；3．在培養(yǎng)的海馬神經元中共表達YFP和GGTβ亞基，免疫熒光化學法檢測神經元單位長度樹突上突觸前標志物Synapsin1和突觸后標志物PSD-95聚集體的數量；4．在培養(yǎng)的海馬神經元中轉染GFP標記的GGTβ siRNA，或轉染YFP后，用GGT特異性抑制劑GGTI-2147處理神經元，檢測神經元單位長度樹突上突觸前標志物Synapsin1和突觸后標志物PSD-95聚集體的數

3、量。
　　 結果：1．GGTβ亞基的蛋白表達水平在突觸發(fā)育的時間窗內逐漸增加，在突觸發(fā)育最快的時間達到高峰；GGTβ亞基位于神經元突觸部位；2．過表達GGTβ亞基促進對突觸前、后蛋白PSD-95、Synapsin1的聚集，下調GGTβ亞基或應用GGT特異性抑制劑GGTI-2147抑制其活性后，則產生相反作用。
　　 結論：1．GGT與神經元突觸發(fā)育密切相關；2．過表達GGT促進神經元突觸發(fā)育，下調GGT表達或抑制其活性抑

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