CBD-bFGF結合膠原支架材料促進犬膀胱重建修復的實驗研究.pdf

1、先天性疾病、炎癥、感染、腫瘤以及創(chuàng)傷等可導致膀胱結構和功能的缺失與損害,而傳統(tǒng)的腸道代膀胱會引起多種并發(fā)癥,如酸堿代謝紊亂、感染、結石甚至惡變等。組織工程技術的發(fā)展為膀胱重建帶來了全新的方法。目前,構建的膀胱組織植入體內后的快速血管化是組織工程膀胱面臨的主要問題,利用在支架材料上復合生長因子為組織工程膀胱體內充分快速血管化提供了一種選擇。
　　堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,b

2、FGF)對創(chuàng)傷愈合、組織修復、血管形成起著重要促進作用,但將 bFGF簡單吸附到材料上再植入體內,體液的浸潤和流動造成因子擴散,導致修復效果有限。因此,我們在bFGF的N端偶聯(lián)膠原結合區(qū)(Collagen binding domain,CBD),使其具有結合膠原能力,在體內可以定點、持續(xù)釋放再生信號分子,同時外源的膠原支架材料也為細胞增殖和組織再生提供了三維空間。
　　本課題以大動物比格犬進行膀胱重建實驗,研究內容包括以下兩個部分

3、:
　　第一部分:比格犬膀胱損傷模型制作及組織工程膀胱的重建。
　　將由中科院遺傳與發(fā)育研究所提供的 CBD-bFGF和膠原支架材料,制備成CBD-bFGF/Collagen材料及 PBS/Collagen材料。13只雄性成年比格犬分為假手術組(Sham operated,n=3)、單純膠原組(PBS/Collagen, n=5)和CBD-bFGF復合膠原材料組(CBD-bFGF/Collagen, n=5),取下腹部旁正中

4、切口暴露膀胱,切除50％~60%膀胱,分別用CBD-bFGF/Collagen材料及PBS/Collagen材料進行膀胱重建。術后1月內單純膠原組及CBD-bFGF復合膠原材料組各有一條比格犬死亡,尸檢后提示原因為膀胱嚴重感染導致膀胱破裂,進一步引起腹腔感染而死亡。各組剩下比格犬全部存活,無尿漏、感染發(fā)生。
　　第二部分:兩種修復材料對比格犬膀胱重建修復作用評價。
　　術后6月,我們對所有比格犬的膀胱進行了形態(tài)學、組織學及功

5、能學檢測,評價兩種修復材料對比格犬膀胱重建修復作用。尿動力學分析結果:膀胱最大容量和順應性在PBS/Collagen組、CBD-bFGF/Collagen組、Sham operated組依次增加,3組間比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而CBD-bFGF/Collagen組和Sham operated組逼尿肌最大壓力比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。靜脈腎盂造影及逆行膀胱造影結果:腎臟、輸尿管正常顯影,膀胱輪廓清晰,形態(tài)正常。大