水通道蛋白9在人肝癌組織中的表達及意義.pdf

1、背景：
　　 肝細胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，以其高發(fā)病率和高度惡性行為著稱，占我國癌癥死亡率的第二位。隨著肝臟影像學技術的進步，肝切除技術的發(fā)展及圍手術期管理知識和經(jīng)驗的不斷積累，肝細胞癌患者的治療效果較前有了顯著提高，但是患者的總體預后仍不令人滿意，肝癌術后5年累計復發(fā)率可高達35％-75％。究其原因，與肝癌惡性程度高，一般情況下癌灶周圍血供豐富，腫瘤進展快，

2、早期易發(fā)生腫瘤細胞的肝內(nèi)和/或肝外微轉(zhuǎn)移，或者出現(xiàn)肝臟門脈的癌栓，加之手術有時不能徹底切凈癌灶，手術過程中還有可能造成醫(yī)源性的肝癌細胞轉(zhuǎn)移，術后對化療藥物不甚敏感有關。因此，要想更好更徹底的治療肝細胞癌，必須全方面多時段的了解掌握肝細胞癌進程，尋找突破口。
　　 腫瘤分子細胞生物學是近年來新興的一門學科，它通過各種現(xiàn)代分子生物學技術，在基因和分子的水平上研究腫瘤的發(fā)生機理，揭示腫瘤細胞在基因組DNA的突變、表觀遺傳學方面變化引起

3、的基因轉(zhuǎn)錄表達異常、以及細胞信號轉(zhuǎn)導方面發(fā)生的紊亂，發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞在以上方面和正常細胞的區(qū)別，并最終將這些知識用于腫瘤的診斷、治療和新型抗腫瘤藥物的設計和研發(fā)，達到最大程度地早期診斷腫瘤和最終治愈腫瘤的目的。近年來，腫瘤分子生物學推斷水通道蛋白(aquaporin，AQP)將可能是針對腫瘤細胞生存、侵襲和轉(zhuǎn)移的一種新的作用靶點。
　　 目前研究發(fā)現(xiàn)水通道蛋白(aquaporin，AQP)是一種廣泛存在于細胞膜上的水通透性蛋白，在哺

4、乳動物各種組織細胞中有著廣泛的分布，已知的在哺乳類共發(fā)現(xiàn)有13個成員（命名為AQP0～12），其中AQP9具有獨特的轉(zhuǎn)運活性，除了對水有轉(zhuǎn)運活性外，還對其他多種非帶電的中性物質(zhì)，如脲、多羥基化合物、嘌呤、嘧啶、尿素等具有通透性，包括對常用的抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶具有轉(zhuǎn)運活性。因此本實驗研究以肝細胞癌為研究對象，應用免疫組織化學和蛋白免疫印跡方法研究水通道蛋白9(AQP9)在人肝細胞癌組織和正常肝組織中的表達差異，旨在初步探討表達差異的意

5、義。
　　 方法：
　　 1.應用免疫組織化學(IHC)技術檢測AQP9在肝細胞癌組織和非肝細胞癌組織中的分布及表達情況
　　 實驗分為肝細胞癌組織組(n＝42)和非肝細胞癌組織組(n＝42)，分別切取石蠟切片，應用免疫組織化學技術檢測兩組組織中AQP9的表達與分布；
　　 2.應用蛋白免疫印跡(Western Blot，WB)試驗方法半定量的檢測AQP9在肝細胞癌組織和正常肝組織中的表達情況；
　

6、　 3.統(tǒng)計所有42例肝細胞癌患者臨床資料，追蹤患者術后病檢結果；
　　 4.用統(tǒng)計學方法進行分析，以確定AQP9在兩組之間表達是否具有差異，是否與患者臨床病理參數(shù)有關聯(lián)。
　　 結果：
　　 1.應用免疫組織化學方法可以檢測出AQP9在兩組組織中的表達；
　　 2.應用蛋白免疫印跡法可以半定量的檢測AQP9在兩組組織中的表達；
　　 3.AQP9在非癌組織中的高表達率為73.81％(31/42

7、)，在癌組織中高表達率為40.48％(17/42)，AQP9在非肝癌組織和肝癌組織中表達情況存在顯著性差異(P＜0.01)；
　　 4.統(tǒng)計學分析表明，Ⅰ-Ⅱ級分化肝癌組織和Ⅲ-Ⅳ分化肝癌組織之間AQP9表達水平之間有統(tǒng)計學差異。
　　 結論：
　　 1.在肝細胞癌組織和非肝細胞癌組織中均能檢測到AQP9的表達；
　　 2.AQP9在非肝癌組織的表達要高于其在肝癌組織中表達；
　　 3.AQP9在