番茄花粉高賴氨酸基因TSB導入中間偃麥草及轉基因植株再生.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本實驗通過RT-PCR從番茄花粉中獲得高效特異表達的高賴氨酸基因TSB的cDNA序列，構建其受控于單子葉植物Ubil強啟動子下的高效表達質粒pBIUB-TSB。與此同時，以禾本科牧草中間偃麥草為材料，以它的成熟種子為外植體，建立簡單的植株再生體系，并將構建好的表達載體通過基因槍和激光微束穿刺轉化法將其導入到中間偃麥草愈傷組織中，通過卡那霉素篩選，得到再生植株。實驗結果表明： 我們建立了中間偃麥草簡單的植株再生體系：(1)愈傷誘導

2、培養(yǎng)基：MS+2.4-D(4.5mg/L)+BA0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6,5g/L，pH值5.8～6.0；(2)愈傷繼代培養(yǎng)基：MS+2.4-D 4mg/L+BA 0.1mg/L+Vc 5mg/L+蔗糖30g+瓊脂6.5g/L+肌醇100mg/LpH值5.8～6.0；(3)芽分化培養(yǎng)基：MS+BA 2mg/L+NAAlmg/L+COCl<,2> 5mg/L+ZT0.5mg/L+蔗糖30g+肌醇100mg/L+瓊脂6.5g/

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