積雪草苷及其類似物的吸收和代謝性質研究.pdf

1、目的:本實驗室在活性篩選階段發(fā)現(xiàn)積雪草苷具有新的藥理活性，初步研究顯示其口服生物利用度很低。本研究采用體外、體內、在體和計算機預測等手段對積雪草苷及其類似物的吸收、代謝性質進行研究，以期闡明積雪草苷生物利用度低的原因，并指導進一步的開發(fā)。 方法: 1．HPLC法檢測積雪草苷的溶解度和LogD值，軟件預測積雪草苷的piti值和LogP值。 2．MTT法檢測樣品對Caco一2細胞和MDCK細胞的細胞毒性，MTT法和L

2、DH法檢測樣品對大鼠原代肝細胞的毒性。 3．運用在體單向灌流模型研究大鼠腸道對積雪草苷和積雪草酸的吸收，求得有效滲透系數(shù)Pm；使用MDCK細胞模型檢測各化合物轉運的表觀滲透系數(shù)Papp。 4．制備大鼠原代肝細胞和大鼠肝臟微粒體，研究肝臟中代謝酶對積雪草苷的作用；制備大鼠腸道細菌的分泌酶溶液，以TLC法和LC-MS法檢測體外實驗代謝產物，LC-MS法檢測體內實驗大鼠尿、血中的代謝產物。 結果: 1．積雪草苷

3、在水溶液中極微溶解；各PH值下的LogD值在O．44至0．48之間；軟件預測各羥基piti值均在12以上，LogP值為1．07；僅油水分配系數(shù)沒有違反“五律”。 2．積雪草苷和羥基積雪草苷對Caco-2細胞、MDCK細胞和原代肝細胞在測定濃度范圍內無生長抑制作用，積雪草酸對和羥基積雪草酸在高濃度時對細胞生長有明顯的抑制作用。 3．大鼠的各個腸段對積雪草苷的吸收均較低，最高Peff為6．43×10％m／s，吸收機制為被動轉

4、運，抑制P一糖蛋白不能使吸收明顯增加，苷元積雪草酸在結腸段吸收程度較高，最高Peff為34.5×10％m／s；在MDCK細胞模型中，積雪草苷最高Papp為2.47×10-6cm／s，苷元積雪草酸最高為5．92×10-acm／s。 4．積雪草苷在大鼠肝微粒體和肝細胞中的代謝穩(wěn)定性很高；口服積雪草苷90％以上以苷元形式排出體外，積雪草苷可被大鼠腸內菌群代謝生成三個代謝產物，原形物和代謝產物均為吸收入血成分。 結論:積雪草苷在