缺氧對大鼠腦線粒體氧化呼吸功能和ANT活性及異構體表達的影響.pdf

1、該研究將健康雄性Wistar大鼠暴露于模擬海拔5000米高原低壓艙內,23小時/天,分別連續(xù)缺氧1天(H1)、5天(H5)、15天(H15)和30天(H30),同時設立平原對照組.各缺氧組與對照組分別在模擬高原低壓艙內和平原斷頭處死,差速離心分離大鼠腦線粒體,Clark氧電極法測定線粒體呼吸活性,HPLC分析線粒體內腺苷酸含量,抑制劑(CAT)滴定法定量ANT對氧耗速率的控制度以及估計線粒體ANT載體密度,H<'3>-ADP攝入法測定A

2、NT的轉運速率,熒光定量RT-PCR檢測ANT1、ANT2mRNA表達量,Western blot測定ANT蛋白表達.主要結果和結論如下:結論:1.缺氧可顯著抑制腦線粒體的氧化磷酸化功能,降低電子傳遞速率和呼吸氧耗,而增加不伴有ATP生成的"無效氧耗",長期慢性缺氧后"無效氧耗"降低,是缺氧時節(jié)約用氧的一種有效方式,提示可能為缺氧適應的機制之一.2.缺氧暴露后在不改變線粒體內膜上ANT密度的同時,可顯著抑制ANT轉運活性,從而降低能量產

3、生和利用的周轉率,這可能是缺氧時細胞能量代謝障礙的重要機制.3.ANT對大鼠腦線粒體氧化呼吸過程有較高的控制作用,可占整個呼吸環(huán)節(jié)的一半以上.缺氧雖可抑制ANT活性,但是并不降低其對氧化磷酸化的控制程度,提示線粒體氧化磷酸化功能障礙與ANT活性降低有關,而與ANT對氧化磷酸化的控制程度無關.4.缺氧暴露可使腦組織ANT1、ANT2mRNA表達量同時增加,而ANT2增長幅度大于ANT1,提示ANT2在缺氧代償及缺氧耐受方面較ANT1有更為