人角膜緣組織結(jié)構(gòu)及祖細(xì)胞群增殖力年齡變化規(guī)律的研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文人角膜緣組織結(jié)構(gòu)及祖細(xì)胞群增殖力年齡變化規(guī)律的研究Age—relatedChangesInHumanLimbalMicrostructureAndProliferativeAbilityOfLimbalProgenitorCells研究方向：眼科學(xué)碩士研究生：鄭天玉導(dǎo)師：徐建江教授指導(dǎo)小組成員：陳榮家教授龔嵐副教授樂(lè)琦驊博士復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院2008年4月?！稴《≯，_訂擴(kuò)，j”‘∽善I爺，∥鏟鱸第摘要

2、角膜緣部位是眼科研究中的熱點(diǎn)之一，因?yàn)榇颂幒刑厥獾腣o百柵欄結(jié)構(gòu)(VogtPalisades)，且角膜上皮的干細(xì)胞與其直接子代瞬間擴(kuò)增細(xì)胞位于此結(jié)構(gòu)中的上皮基底層，二者共同構(gòu)成角膜緣祖細(xì)胞群(1imbalprogenitorcells)。該細(xì)胞群具有高度增殖和應(yīng)激增殖能力，承擔(dān)角膜上皮正常的補(bǔ)充和創(chuàng)傷后的修復(fù)功能，對(duì)于維持穩(wěn)定的眼表環(huán)境至關(guān)重要。V0垂柵欄結(jié)構(gòu)為其提供必要的龕環(huán)境，對(duì)維持其高增殖力和誘導(dǎo)定向分化起關(guān)鍵作用。隨著年齡的增

3、長(zhǎng)，角膜緣組織環(huán)境和其中細(xì)胞受到內(nèi)外環(huán)境的影響，作為一個(gè)外周干細(xì)胞池，其龕環(huán)境和祖細(xì)胞群在正常狀態(tài)下、在人的一生中如何演變由于既往觀察手段的限制，這一問(wèn)題未能得到解答。本研究第一部分通過(guò)活體角膜共焦顯微鏡(invivoconfocalmicroscopy，CM)觀察四個(gè)年齡段正常人角膜緣微觀結(jié)構(gòu)，了解其Vo或柵欄存在比例、形態(tài)特點(diǎn)、及上皮基底細(xì)胞群的細(xì)胞形態(tài)和大小的年齡改變，借此探討角膜緣龕環(huán)境、角膜緣祖細(xì)胞群的數(shù)量和增殖活力隨年齡變化

4、的規(guī)律。第二部分通過(guò)對(duì)不同年齡組的新鮮離體角膜緣組織行增殖細(xì)胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen，PCNA)免疫組織化學(xué)染色，評(píng)價(jià)角膜緣祖細(xì)胞群增殖力的年齡變化；并對(duì)新鮮離體角膜緣行透射電子顯微鏡檢查，觀察其上皮基底細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的年齡改變，綜合評(píng)價(jià)細(xì)胞分化程度和增殖活力的改變。第一部分人角膜緣結(jié)構(gòu)年齡變化規(guī)律的共焦顯微鏡研究目的應(yīng)用CM研究人角膜緣干細(xì)胞龕環(huán)境和角膜緣祖細(xì)胞群活力和數(shù)量的年齡變化規(guī)律。