肝細胞癌中apoM表達水平及其與HNF-1α、LRH-1相關性研究.pdf

1、目的：檢測肝細胞癌(HCC)患者和健康者血漿中載脂蛋白M（apoM）的表達水平；同時，檢測正常肝組織、癌旁組織和肝細胞癌組織中 apoM、肝受體同系物1（LRH-1）、肝細胞核因子1α（HNF-1α）的表達；運用RNAi技術觀察干擾HepG2細胞內HNF-1α后apoM及其相關脂蛋白apoA-I、FXR、SHP-1、HMGCR、CYP7A1的變化，探討肝細胞癌中apoM的表達及apoM表達水平與LRH-1、HNF-1α表達水平的相關性，

2、及影響apoM表達的分子機制。
　　方法：運用western blot檢測血漿中apoM水平；采用RT-PCR方法檢測肝細胞癌和癌旁組織中apoM、LRH-1、HNF-1αmRNA水平表達；運用免疫組織化學方法檢測肝細胞癌、癌旁組織和正常肝組織中apoM、HNF-1α蛋白水平的表達，比較肝細胞癌、癌旁組織和正常肝組織中apoM、LRH-1、HNF-1α的表達水平，分析LRH-1、HNF-1α與apoM的相關性；采用RNAi技術，體

3、外觀察HNF-1α對apoM及其相關脂蛋白apoA-I、FXR、SHP-1、HMGCR、CYP7A1表達的影響。
　　結果：肝細胞癌患者血漿中apoM的蛋白水平明顯高于健康者(P<0.01)；apoM、LRH-1和HNF-1α mRNA在肝細胞癌組織中的表達高于癌旁組織(P<0.01)，apoM、HNF-1α蛋白在肝細胞癌組織中的表達亦明顯高于癌旁組織(P<0.05),癌旁組織中apoM蛋白表達高于正常肝組織(P<0.05)，HN

4、F-1α蛋白在癌旁組織與正常肝組織表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；肝細胞癌和癌旁組織中LRH-1、HNF-1α和apoM mRNA表達存在顯著相關性（P<0.01）；采用RNAi技術成功干擾HNF-1α在HepG2細胞中的表達，干擾效率在mRNA和蛋白水平分別為：76.3％、78.4%；RT-PCR結果顯示，干擾HNF-1α能明顯抑制apoM、FXR、SHP-1 mNRA的表達，與陰性對照相比分別下降：47.4%、47.9%、65.2

5、%（p<0.01），增強HMGCR、CYP7A1 mRNA的表達，與陰性對照相比分別增高：101.1%、138.5%（p<0.01），而在 mRNA水平對apoA-I的表達無明顯影響（p>0.05）。
　　結論：肝細胞癌患者血漿中apoM表達水平明顯高于健康者；apoM在肝細胞癌組織、癌旁組織和正常肝組織中表達具有顯著性差異，且 LRH-1、HNF-1α與 apoM表達存在正相關性；HNF-1α是apoM表達和膽固醇合成與轉化的重