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文檔簡介
1、目的:研究RAGE在不同轉移潛能人肝癌細胞系中的表達差異,及其對肝癌細胞增殖、侵襲及遷移能力的影響,并探討NF-κB信號通路在此過程中的作用。
方法:本研究選取無轉移潛能人肝癌細胞系Hep3B、低轉移潛能人肝癌細胞系MHCC97L及高轉移人肝癌細胞系HCCLM3作為實驗對象,通過RT-PCR、Western blot、ELISA方法分別檢測RAGEmRNA、RAGE蛋白表達及細胞上清液中可溶性RAGE(sRAGE)的水平,
2、并選取高轉移潛能人肝癌細胞系HCCLM3,采用體外siRNA干擾、外源加入RAGE抗體或sRAGE蛋白的方法進行干預,運用MTT及臺盼藍方法檢測HCCLM3細胞的增殖活性、Transwell小室檢測細胞的侵襲能力、細胞劃痕愈合實驗檢測細胞的遷移能力,RT-PCR和Western blot方法檢測NF-κB P50、P65 mRNA及蛋白的表達水平。
結果:1.高轉移潛能人肝癌細胞系HCCLM3 RAGE mRNA及蛋白表達
3、水平均高于低及無轉移潛能人肝癌細胞系MHCC97L、Hep3B,細胞上清中sRAGE的水平與人肝癌細胞系的轉移潛能負相關。2.siRNA干擾RAGE表達或RAGE抗體、sRAGE蛋白抑制RAGE信號傳導后HCCLM3細胞的增殖活性、侵襲及遷移能力均減弱。3.RAGE表達減弱或RAGE信號通路受抑后HCCLM3細胞NF-κBP50、P65 mRNA及蛋白表達水平均下降。
結論:1.人肝癌細胞系表達RAGE的水平與其轉移潛能相
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