Graves病甲狀腺組織中Th-,1--Th-,2-類細胞因子基因的表達.pdf

1、目的；Graves病(gravesdisease,簡稱GD)又稱毒性彌漫性甲狀腺腫或Basedow病，是一種常見的自身免疫性疾病(AITD)，病變部位主要發(fā)生在甲狀腺器官上，屬于涉及細胞免疫和體液免疫紊亂的器官特異性自身免疫病。本病的病因和發(fā)病機制尚未完全明確。近年來，輔助性T細胞Th1/Th2亞群的區(qū)分極大地提高了人們對細胞因子網絡的認識，機體Th1/Th2平衡狀態(tài)失調與腫瘤免疫逃逸，細菌、病毒等微生物感染有一定關系，并參與變態(tài)免疫性

2、疾病、自身免疫性疾病如Graves病的發(fā)生。細胞因子作為一組重要的免疫介質，能夠廣泛的調節(jié)機體的免疫功能，而且對甲狀腺濾泡上皮細胞亦產生重要的影響(1)。另一方面，他們又可以通過改變免疫活性細胞和甲狀腺細胞的某些功能狀態(tài)直接或間接參與自身免疫性甲狀腺疾病(AITD)的發(fā)生和發(fā)展。已經證實，Graves病存在著免疫功能的紊亂，但是究竟以細胞免疫為主，還是以體液免疫為主，，即是以Th1類細胞因子表達為主，還是以Th2類細胞因子表達為主，換言

3、之，是否存在著漂移現(xiàn)象?為回答上述問題，本研究選擇IFN-γ、TNF-α、IL-2代表Th1類細胞因子，IL-4、IL-6、IL-10代表Th2類細胞因子，應用逆轉錄—聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法分別檢測了Graves病患者和正常人甲狀腺組織細胞中細胞因子的表達模式，并同時檢測血清中TNF-α，IL-2，IL-6細胞因子的水平及于甲狀腺功能指標的關系，探討其發(fā)病與Th1/Th2類細胞因子的表達關系。明確Graves病的Th1/Th2

4、相關細胞因子群譜的特征。 方法；所有研究對象根據(jù)病史和輔助檢查分為2個大組：GD組：選擇初診的GD患者22例，均未用過甲狀腺藥物或放射性131I治療，男性10例，女性12例，平均年齡35(19～53)歲。正常對照組：25例，男性12人，女性13人，平均年齡34(25～46)歲，為孤立性甲狀腺腺瘤或甲狀腺囊腫手術患者的病變旁正常甲狀腺組織(甲狀腺囊腫14例，孤立性甲狀腺腺瘤11例)，甲狀腺功能(TT3、TT4、FT3、FT4、sT

5、SH)和其他規(guī)定的輔助檢查正常，診斷及正常甲狀腺組織經病理確診。從組織提取總RNA，并采用逆轉錄—聚合酶鏈反應(RT-PCR)分析方法檢測IFN-γ、TNF-α，IL-2、IL-4、IL-6、IL-10等6種細胞因子的mRNA轉錄。并采用ELISA方法對所有對象的血清中細胞因子TNF-α、IL-2、IL-6水平檢測，甲狀腺功能TT3、TT4、FT3，F(xiàn)T4和sTSH用放射免疫法測定。結果的比較成組t檢驗，四格表的確切概率法，直線相關進行

6、統(tǒng)計學處理。 結果；正常對照組Th1/Th2類細胞因子的基因轉錄的檢測中，所有25名健康者IFN-γ、IFN-α、IL-2、IL-4、IL-10均無轉錄，僅有2名轉錄IL-6。與正常對照組比較，GD組細胞因子的基因轉錄檢出率為36.36％，較正常對照組細胞因子表達率1.33％明顯增高(P＜0.01)；在GD組，Th2細胞因子(IL-4、IL-6)的基因轉錄檢出率為53.03％，明顯高于Th1類細胞因子(IFN-γ、TNF-α，I

7、L-2)的基因轉錄檢出率19.70％，差異具有顯著性(P＜0.01)。由此說明，正常甲狀腺組織亦可少量的表達IL-6，但在病理條件下，可異常的產生IL-4、IL-6在內的多種細胞因子，且Graves病患者Th1相關細胞因子的表達率明顯低于Th2相關細胞因子的表達率。 血清細胞因子ELISA檢測結果也相應顯示，GD患者血清中Th1類細胞因子IL-2值11.75±0.96pg/ml均明顯低于正常對照組14.54±1.27pg/ml，

8、GD組與正常對照組比較，(P＜0.01)，有顯著性差異。Th2類細胞因子IL-6的血清水平166.87±26.12pg/ml則明顯高于正常對照組96.79±29.72pg/ml，差異具有顯著性(P＜0.05)。兩實驗結果成對應表達，顯示向Th2細胞因子方向偏移。 此外，細胞因子間的關系也很復雜，IL-6與TNF-α呈有意義直線正相關(r=0.412,P＜0.05)，并且與FT3、FT4、TT3、TT4呈有意義正相關(P＜0.05

9、～0.01)，與IL-2呈顯著直線負相關(r=-0.631,P＜0.01)。TNF-α與IL-2無直線負相關關系(r=-0.298,P＞0.05)。細胞因子與甲狀腺功能的關系為：IL-6與TT3、TT4、FT3、FT4均呈直線正相關，(分別為r=0.481，P＜0.01；r=0.522，P＜0.01；r=0.468，P＜0.05；r=0.37，P＜0.05)，與sTSH呈直線負相關(r=-0.396，P＜0.05)。IL-2與TT3、T

10、T4、FT3、FT4均呈直線負相關(r=-0.476，P＜0.01；r=-0.491，P＜0.01；r=0.426，P＜0.05；r=-0.401,P＜0.05)與sTSH呈直線正相關(r=0.352P＜0.05)。TNF-α與FT3、FT4、TT3、TT4、sTSH無明顯相關關系，表明細胞因子的產生和分泌是受到多種調節(jié)機制的影響，其有復雜的調節(jié)甲狀腺的機制。 結論；1、Graves病患者甲狀腺細胞中細胞因子的表達模式有異于正常