一株拮抗馬鈴薯晚疫病菌菌株的分離鑒定及抑菌性初步分析.pdf

1、由致病疫霉Phytophthora infestans(Mont.) de Bary引起的馬鈴薯晚疫病是生產(chǎn)上最重要的農(nóng)業(yè)病害之一，每年造成我國(guó)約65-130億元的經(jīng)濟(jì)損失。通過(guò)篩選和鑒定對(duì)致病疫霉有拮抗作用的菌種資源來(lái)防治馬鈴薯晚疫病，這在生產(chǎn)上具有廣闊的應(yīng)用潛力。
　　地絲菌屬真菌Geomyces sp.WZJ是本實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)馬鈴薯晚疫病菌時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)并分離得到的。通過(guò)對(duì)峙實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其對(duì)馬鈴薯晚疫病菌不同菌株的抑制效率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該

2、菌株對(duì)本實(shí)驗(yàn)室保存的13個(gè)馬鈴薯晚疫病菌菌株具有相似的抑制作用，抑制效率在64.4％-78.5％之間。檢測(cè)其抑菌譜發(fā)現(xiàn)，該菌株對(duì)辣椒疫霉（P.capsici）、大豆疫霉(P.sojae)和煙草黑脛病菌(P.nicotianae)等卵菌病原也具有良好的拮抗效果，抑制率分別達(dá)到68.4％、58.5％、58.7％，而對(duì)其它真菌病害抑制效率較差，說(shuō)明該菌株對(duì)疫霉屬病原菌具有一定的特異性拮抗作用。
　　通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行鑒定

3、，將該菌株鑒定為地絲菌屬真菌并命名為Geomyces sp.WZJ。生物學(xué)特性研究表明，該菌株在RA、PDA、PSA培養(yǎng)基上均能正常生長(zhǎng)，在查氏培養(yǎng)基(Czapek)不能正常生長(zhǎng)，菌落直徑最小。在PSA培養(yǎng)基產(chǎn)生孢子較多，菌絲生長(zhǎng)最快，最適合其生長(zhǎng);該菌株在4-25℃均能生長(zhǎng)，最適溫度為18℃，適于低溫生長(zhǎng);對(duì)pH要求不嚴(yán)格，在pH5-12范圍內(nèi)均能生長(zhǎng)，最適pH為6。
　　對(duì)該菌株進(jìn)行液體發(fā)酵，得到發(fā)酵上清液，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵上清

4、液具有良好的抑菌效果，而菌絲體提取物基本無(wú)抑菌活性，說(shuō)明抑菌物質(zhì)被分泌到胞外起作用。通過(guò)生長(zhǎng)速率法檢測(cè)發(fā)酵上清液的抑菌效率，結(jié)果顯示，發(fā)酵5d的發(fā)酵上清液與黑麥培養(yǎng)基體積比為1∶25時(shí)，抑菌效率為35.6％;發(fā)酵10d的發(fā)酵上清液與黑麥培養(yǎng)基體積比為1∶25時(shí)，抑菌效率為93.6％，說(shuō)明在一定培養(yǎng)時(shí)間范圍內(nèi)，隨著發(fā)酵天數(shù)的增高，抑菌物質(zhì)逐漸增多。測(cè)定發(fā)酵16d的發(fā)酵上清液的“IC50”，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，將發(fā)酵上清液稀釋176倍時(shí)，該上清液對(duì)馬