兒童急性淋巴細(xì)胞白血病免疫球蛋白重鏈基因重排的檢測(cè)及其臨床意義.pdf

1、目的:探討兒童急性淋巴細(xì)胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL)患兒IgH基因克隆性重排的情況及其意義。同時(shí)探討了兩種不同的電泳方法在ALL患兒IgH基因重排研究中的差異及其應(yīng)用價(jià)值。 方法:從38例(初治36例、復(fù)發(fā)2例)的ALL患兒外周血或骨髓中提取DNA，其中35例是B系急性淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)，3例是T系急性淋巴細(xì)胞白血病(T-ALL)。采用半巢式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Semi-ne

2、st Polymerase Chain Reaction，Semi-nest PCR)技術(shù)對(duì)IgH基因重排進(jìn)行擴(kuò)增，應(yīng)用瓊脂糖凝膠電泳(Agrose Gel Electrophoresis，AGE)和單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(Single Strand Conformation Polymorphism Analysis，SSCP)對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行研究，對(duì)接受治療的 16 例 IgH 陽(yáng)性患兒，取其誘導(dǎo)結(jié)束時(shí)骨髓標(biāo)本進(jìn)一步研究。 結(jié)果:

3、①38例ALL擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)AGE檢測(cè)，IgH基因克隆性重排陽(yáng)性34例(88.47％)，其中32例為B-ALL(94.12％)，2例為T(mén)-ALL(66.67％)；經(jīng)SSCP檢測(cè)，在AGE表達(dá)陽(yáng)性的34例中有27例陽(yáng)性，7例陰性，另外AGE檢測(cè)陰性者仍為陰性，而26例B-ALL為陽(yáng)性(74.28％)，1例T-ALL陽(yáng)性(33.33％)。在AGE中真陽(yáng)性和假陽(yáng)性條帶有差異。②對(duì)16例患兒化療前后標(biāo)本進(jìn)行了跟蹤觀察，化療前16例基因克隆性重排均為

4、陽(yáng)性；達(dá)完全緩解后，MRD陽(yáng)性者6例。其中2例分別在隨訪的第3個(gè)月和第8個(gè)月復(fù)發(fā)，1例在隨訪的第25月復(fù)發(fā)。另外3例MRD陽(yáng)性及10例MRD陰性患者均呈持續(xù)緩解狀態(tài)。③27例SSCP陽(yáng)性標(biāo)本中，8例觀察到寡/亞克隆(28.62％)。其中6例接受治療，誘導(dǎo)緩解后，2例未能緩解，隨訪1年，有3例復(fù)發(fā)(50％)；14例單克隆重排患兒，誘導(dǎo)緩后，1例未完全緩解，隨訪1年，有1例復(fù)發(fā)(7.14％)。復(fù)發(fā)的1例患兒，觀察到克隆演化。 結(jié)論: