番茄miR172的表達模式分析與功能驗證.pdf

1、在植物的生長發(fā)育過程中，miRNAs對器官的發(fā)育和分類起到了重要的作用。它可以通過翻譯抑制或者降解mRNA來調控靶向基因的表達。在植物眾多的miRNA家族中，miR172是其中非常保守的一類家族，該家族成員通過翻譯抑制或降解mRNA，或者二者兼而有之的方式來進行調節(jié)。之前有報道表明，miR172的靶向基因是AP2類乙烯響應因子。
　　本研究中，我們在Micro-Tom（Solanum lycopersicum L.cv.）野生型番

2、茄里超表達和抑制表達miR172家族的兩個前體：pre-miR172b和pre-miR172Hom，之后通過定量PCR分析野生型和轉基因番茄中的miRNAs表達模式，從而確定miR172的功能。此外，我們還預測了8個miR172的AP2類靶向基因，同時分析了這8個基因在野生型和轉基因番茄中的表達水平。
　　定量PCR結果顯示，在野生型番茄的營養(yǎng)期內，miR172表達水平在莖中最高；進入生殖期后，其表達量在破色期呈最低狀態(tài)，之后逐漸

3、恢復，紅果期又達到了最高水平。這也解釋了番茄中超表達miR172b和miR172Hom后，植物會出現了葉片和莖變寬增厚的原因。隨著番茄在生殖期時的靶標基因SlAP2a,SlAP2h,SlAP2b和SlAP2c表達水平的提高，超表達miR172b和miR172Hom會使果實呈現出膨大及方向型缺損的表型。此外，根據本研究發(fā)現，野生型番茄的果實從營養(yǎng)期到成熟期的過渡階段要早于超表達轉基因番茄。
　　表型分析及表達水平分析顯示，植物中mi