體液細胞學及檢驗規(guī)范化

1、體液細胞學及檢驗規(guī)范化,,內 容,尿液細胞學檢測腦脊液、漿膜腔積液細胞學檢測糞便、前列腺、精液細胞學檢測,尿液細胞學檢測 ---- 尿液沉渣檢查標準化,一、材料與器材 （一）留置標本的容器 1.收集和運送尿液容器 2.用于離心尿液的離心管 3.用于尿沉渣分析的玻片,一、材料與器材,（二）尿沉渣檢測尿沉渣的量（三）離心機：水平式離心機 相對離心力（RCF）應在400

2、5;g左右。離心機轉速與RCF的換算公式為： r/min=1000×[G/(11.18×半徑]1/2,不同直徑 不同轉數,離心半徑為20cm時,1338r/min(1350r/min）離心半徑為16cm時,1495r/min(1500r/min)離心半徑為10cm時,1892r/min(1900r/min),一、材料與器材,（四）顯微鏡尿沉渣檢查（五）自動化設備 （六）計算機數據處理系統(tǒng),二、標

3、本的收集及運送,（一）標本的收集 （二）標本的運送 （三）標本的標記 （四）標本的接收,三、尿沉渣檢驗的操作步驟,（一）離心 （二）鏡檢沉渣 取1滴充液到專用尿沉渣檢測板里，計數1µl計算區(qū)內的管型或細胞數報告。 尿結晶、細菌、寄生蟲等以每一高倍視野 -、±、+、++、+++報告。,顯微鏡觀察尿結晶、細菌、寄生蟲等報告方式,三、尿沉渣檢驗的操作步驟,（三）尿沉渣的檢查內容應包括： 1.細胞：紅

4、細胞、白細胞、吞噬細胞、上皮細胞、腫瘤細胞 2.管型：透明管型、細胞管型、顆粒管型、蠟樣管型、細菌管型、脂肪管型、混合管型、寬形管型 3.結晶：磷酸鹽、草酸鈣、尿酸結晶和藥物結晶 4.細菌、寄生蟲（或卵）、酵母菌、精子、粘液。 5.臨床醫(yī)生特殊要求的其他成分。,三、尿沉渣檢驗的操作步驟,（四）有條件的實驗應開展各種尿液有形成分的染色檢查，以便于有形成分的進一步鑒別；具備多種類顯微鏡進行尿沉渣分析的實驗室，建議配置相差顯微鏡、暗視

5、野顯微鏡，提高尿沉渣的鑒別能力。,標準流程,新鮮尿液混勻，取10ml放在離心試管內，以400g的速度離心5分離心后將上清棄去，沉渣量約0.2ml，輕搖使沉渣混合均勻。取一滴置于載物片上，用18×18mm蓋玻片覆蓋標本。顯微鏡下觀察。先以10倍物鏡觀察全片，注意有無管型等較大成分存在，再換40倍物鏡觀察有形成分的種類和數量。觀察10個視野并記錄所見倒的細胞和管型數量，以最低值至最高值的方式報告。結晶等有價值的病理發(fā)現(xiàn)應如實

6、報告。,腦脊液細胞學檢測,標本采集,一般由腰穿刺術取得CSF分別收集于3-4只無菌試管內，每管1～2ml，第一管作細菌學檢查，第二管作化學或免疫學檢查，第三管作常規(guī)檢查.標本采集后應立即送檢。,顯微鏡檢查,細胞總數計數方法: 取混勻的CSF滴入計數池,沉淀片刻,低倍鏡計數10個大方格內的紅、白細胞數,總和× 106即得每升CSF的細胞總數。 如果細胞數較多,可計數1個大方格的細胞數乘以10,再乘106。,白細

7、胞計數及直接分類方法:,非血性CSF: 1. 取小試管1只，內放冰醋酸1-2滴，轉動后傾去，滴入混勻的CSF 3-4滴，3-5分鐘后混勻充入計數池，同上計數。,白細胞計數及直接分類方法:,2. 計數后直接換成高倍鏡根據細胞核的形態(tài)分別計數單個核細胞和多核細胞共100個，以百分率表示。細胞數少于100時直接寫出單核、多核細胞的具體個數。,白細胞計數及直接分類方法:,血性CSF：用1%冰醋酸稀釋CSF后進行計數，結果乘以稀釋倍數

8、。細胞總數-白細胞數=紅細胞數,注意事項,（1）腦脊液細胞計數應及時進行，一般應在1小時內進行。（2）細胞計數時，須注意把紅細胞或淋巴細胞與新型隱球菌相區(qū)別,臨床意義:,1.正常腦脊液中無紅細胞,白細胞:成人(0-8) × 106 /L, 兒童(0-15) × 106 /L新生兒(0-30) × 106 /L主要是淋巴及大單核細胞,兩者7:3,臨床意義,2.化腦白細胞數明顯增加,通常>10

9、00 × 106 /L,以多核為主;3.結腦白細胞數中度增加,一般<500 × 106 /L,以早期以多核為主,很快過渡到后期則以單個核細胞為主.,臨床意義:,4.病腦白細胞數僅輕度增加,以淋巴細胞為主.5.腦寄生蟲?。杭毎麛悼稍黾樱訣為主。6.出血性疾?。憾酁榧t細胞7.腫瘤：細胞數正常或輕度增加，以L為主.,漿膜腔脊基液細胞學檢測,漿膜腔積液分類和發(fā)生機理,漏出液（exudate）：為非炎癥性積液，

10、大分子物質及有形成分少 滲出液（transudate）：為炎癥性積液血管通透性增加，大分子物質及有形成分多,,滲出液與漏出液的鑒別診斷,漿膜腔穿刺液的采集和保存,標本由臨床醫(yī)師采集送驗標本最好留取中段液體于消毒容器試管　常規(guī)及細胞學檢查約留取2毫升　生化檢驗留2毫升　厭氧菌培養(yǎng)留1毫升　如查結核桿菌則約需10毫升。,漿膜腔穿刺液的采集和保存,為防止出現(xiàn)凝塊，細胞變性、細菌破壞自溶等，應即時送檢及檢驗。常規(guī)及細胞學

11、檢查可用EDTA·K2抗凝。生化檢查標本可用肝素抗凝。加留1管不加任何抗凝劑用以觀察有無凝固現(xiàn)象。,漿膜腔積液細胞學檢查,----顯 微 鏡 檢 查,1. 細胞計數及分類：,細胞總數計數方法:低倍鏡計數10個大方格內的紅、白細胞數總和× 106即得每升漿膜腔積液的細胞總數如果細胞數較多,可計數1個大方格的細胞數乘以10,再乘以106,,,,1. 細胞計數及分類：,白細胞計數漏出液500 ×

12、;106/L,1. 細胞計數及分類：,(1)直接分類法a.非血性胸腹水:高倍鏡根據細胞核的形態(tài)分別計數單個核細胞和多核細胞共100個，以百分率表示。細胞數少于100時，直接寫出單核、多核細胞的具體個數。,1. 細胞計數及分類：,b.血性胸腹水：用1%冰醋酸稀釋后進行計數，結果乘以稀釋倍數細胞總數－白細胞數=紅細胞數胸腹水白細胞校正數＝胸腹水白細胞測定值－出血增　　　　　　　　　　　　加的白細胞數出血增加的白細胞數＝外

13、周血白細胞數*腦脊液紅細　　　　　　　　　　胞數／外周血紅細胞數,1. 細胞計數及分類：,(2)染色分類法離心沉淀，瑞氏染色,油鏡分類漏出液：主要為淋巴和間皮細胞滲出液：各種細胞增多的臨床意義不同,2.細胞分類的臨床意義,正常漿膜腔積液無紅細胞白細胞:(0-8) × 106 /L,主要是淋巴細胞,2.細胞分類的臨床意義,(1)紅細胞： 多見于惡性腫瘤、結核或穿刺出血(2)中性分葉核粒細胞： 常見于化膿性滲

14、出液和早期漿膜結核(3)淋巴細胞： 主要提示慢性疾病，如結核、梅毒、腫瘤等,2.細胞分類的臨床意義,(4)嗜酸性粒細胞： 見于變態(tài)反應、寄生蟲病、多次穿刺刺激等所致的滲出液。(5)間皮細胞：表示漿膜刺激或受損。,2.細胞分類的臨床意義,(6)狼瘡細胞：偶見于SLE患者的漿膜液。(7)癌細胞：大量形態(tài)不規(guī)則、胞體大小不等、核偏大并可見核仁及胞質染色較深的細胞。,常規(guī)操作流程,,觀察外觀,混勻,計數,細胞分類,,,,糞便檢查,

15、一、直接涂片法1.用生理鹽水將糞便涂成薄片2.制成涂片后，覆蓋片3.蟲卵報告方式未找到注明“未找到蟲卵”；找到幾種報告幾種4.紅細胞、白細胞報告方式：細胞數/HP,直接涂片鏡檢臨床意義,1．細胞(1)白細胞（膿細胞）: 正常糞便中不見或偶見。細菌性痢疾，可見大量白細胞,直接涂片鏡檢臨床意義,(2)紅細胞:細菌性痢疾時紅細胞少于白細胞，散在分 布，形態(tài)正常。阿米巴痢疾時紅細胞多

16、于白細胞，多成堆存 在并有殘碎現(xiàn)象。,直接涂片鏡檢臨床意義,(3)巨噬細胞: 為一種吞噬較大異物的單核細胞;胞體較中性粒細胞為大，圓形、卵圓形或不規(guī)則形，核形多不規(guī)則，含有吞噬顆粒及細胞碎屑。見于細菌性痢疾和直腸炎癥,直接涂片鏡檢臨床意義,(4)腸粘膜上皮細胞: 為柱狀上皮細胞，結腸炎癥、偽膜性腸炎時糞便中大量存在。(5)腫瘤細胞: 乙狀結腸癌、直腸癌時糞便可能發(fā)現(xiàn)成堆的癌細胞

17、。,直接涂片鏡檢臨床意義,2．食物殘渣 正常糞便中偶見淀粉顆粒和脂肪小滴等未及充分消化的食物殘渣。,直接涂片鏡檢臨床意義,(1)淀粉顆粒: 腹瀉者、慢性胰腺炎糞便中可在糞便中大量出現(xiàn)。(2)脂肪小滴: 急、慢性胰腺炎及胰頭癌時，糞便中脂肪小滴增多,直接涂片鏡檢臨床意義,(3)肌肉纖維: 腸蠕動亢進、腹瀉時可見。(4)植物細胞及植物纖維:植物細胞形態(tài)多種，有圓形、長圓形、雙層細胞壁,直接涂片鏡檢臨床意義,

18、3．寄生蟲和寄生蟲卵,前列腺液細胞學檢查,標本采集與處理 前列腺標本一般由臨床醫(yī)生行前列腺按摩術后獲得，可直接涂于玻片上或收集在潔凈的試管中，并立即送檢。,前列腺液細胞學檢查,檢查方法： 1. 濕片法檢查，特殊情況可用涂片染色檢查。濕片法操作簡便、快速，臨床常用。 2. 涂片染色檢查可清晰辨認細胞結構，適合于檢查炎癥細胞和癌細胞，有助于前列腺炎和惡性腫瘤的診斷及鑒別診斷。,前列腺液細胞學檢查,檢查內容及報

19、告方式1.卵磷脂小體（lecithin bodies) 高倍視野中卵磷脂小體數量（百分數）2.RBC 正常偶見RBC（＜5/HP)。增多見于前列腺炎、結核、結石或腫瘤、按摩用力過重。3.白細胞 正常前列腺液白細胞＜10/HP，前列腺炎時白細胞增多并成堆分布。,前列腺液細胞學檢查,精液顯微鏡檢查,１精子活力分析１）精子活動率檢查　精子活動率（％）＝活動精子數／（活動精子數＋不活動精子數）*１００正常:精子活動率≥5

20、0%,２）精子活動力檢查,A級　活動良好，精子呈直線運動D級B級　活動較好，精子活動，但方向不定．C級　活動不良，活動遲鈍，原地轉動D級 不活動，死精子．正常:A級活動精子≥25％ A級和B級的精子≥5０％,２．精子密度與精子總數檢查,精子數／Ｌ＝５個中方格的精子數＊稀釋倍數＊ ５＊１０＊１０６精子總數： 精子數／Ｌ＊精液量（Ｌ）正常精子數: 大于２０＊１０９／Ｌ

21、,３.精子形態(tài)學檢查,３.精子形態(tài)學檢查,正常精子形態(tài)≥3０％,4.精液檢查報告內容及方式,射精量：XX ml 222PH：精子計數： XX１０６／Ｌ202020精子形態(tài)：%正常 303015精子存活率：% 757550精子活力 A級% 252525 A級%+ B