實(shí)驗(yàn)四乳粉中蛋白質(zhì)的檢測(cè)

1、實(shí)驗(yàn)四：乳粉中蛋白質(zhì)的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)四：乳粉中蛋白質(zhì)的檢測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂?、?shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆談P氏定氮法測(cè)牛乳中蛋白質(zhì)的原理與方法。二、實(shí)驗(yàn)原理：二、實(shí)驗(yàn)原理：蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后，再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)的含量。（1）消化試樣與濃硫酸和催化劑一同加熱，使有機(jī)質(zhì)破壞，蛋白質(zhì)分解，其中碳和氫完

2、全被硫酸的分解物氧化為二氧化碳和水逸去，而氨則與硫酸結(jié)合生成硫酸銨，存在溶液中：消化時(shí)加入硫酸銅，是作催化劑，以加速分解反應(yīng)：2244242224242222SOOHCuSOSOHSOCuCOSOSOCuCuSOC??????????有機(jī)物消化完后，溶液具有清澈的硫酸銅的藍(lán)綠色，同時(shí)硫酸銅在下一步蒸餾時(shí)可作堿性反應(yīng)的指示劑。加入硫酸鉀，是為了提高溶液沸點(diǎn)，加速分解這一過(guò)程：224244424222SOOHSOKKHSOKHSOSOHSO

3、K?????在消化過(guò)程中，隨著硫酸的不斷分解，水分的不斷蒸發(fā)，硫酸鉀的濃度逐漸增大，沸點(diǎn)升高，加速了對(duì)有機(jī)物的分解作用。加入過(guò)氧化氫，是利用其氧化性，以加快反應(yīng)速度：4244232223222222222422222SONHSOHNHOHSOCONHCOOHRCHNHOHOHCOOCOOHSOSOH）（＋，，，蛋白質(zhì)（過(guò)量）濃硫酸????????????????????OHOOH2222＋加熱????四、操作方法：四、操作方法：（1）樣

4、品的稱(chēng)取精密稱(chēng)取020~200g固體樣品或200~500g半固體樣品或吸取1000~2500mL（或用減量法稱(chēng)取12~15g）液體樣品約相當(dāng)于氮30~40mg，將樣品和濾紙一起小心移入凱氏燒瓶的球部；液體樣品要用減量法于凱氏燒瓶中，傾倒樣品時(shí)要順著連燒杯一起稱(chēng)重的小玻璃棒小心操作，盡量使樣品不掛在凱氏燒瓶的頸口部。（2）消化在凱氏燒瓶中加入10g硫酸鉀和1g硫酸銅，量取20mL濃硫酸，徐徐加入到凱氏燒瓶中，混合，置于有石棉網(wǎng)的電爐上傾斜

5、加熱（通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行）。一開(kāi)始火要小，小心燒瓶?jī)?nèi)泡沫沖出而影響測(cè)定結(jié)果。當(dāng)瓶?jī)?nèi)發(fā)泡停止，再加大火力，同時(shí)，分?jǐn)?shù)次加入10mL過(guò)氧化氫溶液（加前須燒瓶冷卻一會(huì)兒），沖下瓶頸和瓶壁上的炭化粒。當(dāng)燒瓶?jī)?nèi)容物的顏色逐漸變成透明的淡綠色時(shí)，繼續(xù)消化0.5~1h。（3）轉(zhuǎn)移使消化好的樣品稍冷，沿瓶壁吹入少許水，混合，再逐漸沿瓶壁吹入少許水（防止劇烈沸騰，水迸出燒瓶）至燒瓶?jī)?nèi)液體的體積約60mL，沿玻璃棒將燒瓶壁內(nèi)的液體倒入放有小漏斗的100mL容量瓶