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文檔簡介
1、目的:觀察不同劑量外源性神經節(jié)苷脂(GM-1)對新生大鼠海馬神經干細胞增殖和分化的影響。 方法:從新生大鼠海馬組織分離出神經干細胞,培養(yǎng)于含有EGF(20ng/mL)和bFGF(20ng/mL)神經干細胞培養(yǎng)液中,傳代二次后進行分組實驗。實驗共分五組:(1)對照組僅是神經干細胞基礎培養(yǎng)液,(2)低劑量GM-1組GM-1(0.3μg/ml)+神經干細胞基礎培養(yǎng)液,(3)高低劑量GM-1組GM-1(30μg/ml)+神經干細胞基礎培
2、養(yǎng)液,(4)bFGF組bFGF(20ng/mL)+神經干細胞基礎培養(yǎng)液,(5)bFGF/GM-1組GM-1(30μg/ml)+bFGF(20ng/mL)+神經干細胞基礎培養(yǎng)液。將神經干細胞分別在各組培養(yǎng)液中懸浮培養(yǎng)并貼壁培養(yǎng)誘導分化。采用神經干細胞球直接計數(shù)和繪制生長曲線的方法測定細胞的增殖能力,應用免疫細胞化學技術對神經干細胞分化情況進行鑒定并經統(tǒng)計學處理對各組培養(yǎng)液中形成MAP-2及GFAP的陽性細胞率加以比較。 結果:空白
3、組,低劑量GM-1組神經干細胞生長曲線隨培養(yǎng)天數(shù)的增加而降低。高劑量GM-1組bFGF組及GM-1/bFGF組神經干細胞生長曲線隨培養(yǎng)天數(shù)的增加而升高,形成細胞球的數(shù)量多,直徑大,尤以GM-1/bFGF組最為明顯??瞻捉M,低劑量GM-1組及高劑量GM-1組形成MAP-2及GFAP的陽性細胞少;bFGF組,GM-1/bFGF組培養(yǎng)液中形成MAP-2及GFAP的陽性細胞較多,經統(tǒng)計學處理GM-1/bFGF組與bFGF組,高劑量GM-1組細胞
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